Diabetes: biochip měří glukózu lidskými slinami
Výzkumníci z Brown University vyvinuli nový senzor biochipu, který může selektivně měřit koncentrace glukóza v komplexním roztoku podobném lidské sliny. Pokrok je důležitým krokem směrem k zařízení které by lidem umožnily cukrovka testovat hladiny glukózy bez odebrání krve.
Nový čip využívá řadu specifických chemické reakce v kombinaci s plasmonickou interferometrií, prostředkem pro detekci chemického podpisu sloučenin za použití světla. Přístroj je dostatečně citlivý, aby detekoval rozdíly v koncentracích glukózy, které dosahují pouze několika tisíc molekul ve vzorkovaném objemu.
„Ukázali jsme citlivost potřebnou pro měření koncentrací glukózy typických ve slinách, které jsou obvykle 100 krát nižší než v krvi,“ řekl Domenico Pacifici, odborný asistent inženýrství společnosti Brown, který vedl výzkum. „Teď jsme schopni to udělat s extrémně vysokou specificitou, což znamená, že můžeme odlišit glukózu od složek pozadí slin.“ \ T Nový výzkum je popsán v titulním článku červnového čísla časopisu Nanophotonics. Biočip je vyroben z jednoho čtverečního čtverečku křemene potaženého tenkou vrstvou stříbra. Lept ve stříbře jsou tisíce nanometrů interferometrů - malé štěrbiny s drážkou na každé straně. Drážky měří šířku 200 nanometrů a štěrbina je široká 100 nanometrů - přibližně 1,000 krát tenčí než lidské vlasy. Když se na čipu rozsvítí světlo, drážky způsobují vlnu volných elektronů ve stříbře - polaritu povrchového plasmonu - k šíření směrem ke štěrbině. Tyto vlny interferují se světlem, které prochází štěrbinou. Citlivé detektory pak měří vzory interferencí generovaných drážkami a štěrbinami.
Když je kapalina uložena na čipu, světlo a povrchové plazmonové vlny se šíří touto kapalinou dříve, než se vzájemně ovlivňují. To mění interferenční obrazce snímané detektory v závislosti na chemickém složení kapaliny. Nastavením vzdálenosti mezi drážkami a středovou štěrbinou mohou být interferometry kalibrovány pro detekci podpisu specifických sloučenin nebo molekul s vysokou citlivostí v extrémně malých objemech vzorku. V článku publikovaném v 2012u tým Brown ukázal, že interferometry na biočipu mohou být použity pro detekci glukózy ve vodě. Selektivní detekce glukózy v komplexním roztoku, jako je lidská slina, byla další záležitost.
"Sliny jsou asi 99 procent vody, ale je to 1 procenta, že to není voda, která představuje problémy," řekl Pacifici. „Existují enzymy, soli a další složky, které mohou ovlivnit odezvu senzoru. Tímto příspěvkem jsme vyřešili problém specifičnosti našeho snímacího schématu. “
Oni dělali to tím, že používá chemii barviva vytvořit trackable marker pro glukózu. Výzkumníci přidali mikrofluidní kanály do čipu, aby zavedli dva enzymy, které reagují s glukózou velmi specifickým způsobem. První enzym, oxidáza glukózy, reaguje s glukózou za vzniku molekuly peroxidu vodíku. Tato molekula pak reaguje s druhým enzymem, křenovou peroxidázou, aby vytvořila molekulu zvanou resorufin, která může absorbovat a emitovat červené světlo, čímž se roztok zbarví. Výzkumníci pak mohli naladit interferometry, aby hledali červené molekuly resorufinu.
"Reakce se odehrává jedním směrem: molekula glukózy generuje jednu molekulu resorufinu," řekl Pacifici. "Takže můžeme spočítat počet resorufinových molekul v roztoku a odvodit počet molekul glukózy, které byly původně přítomny v roztoku."
Tým testoval svou kombinaci chemie barviv a plasmonické interferometrie hledáním glukózy v umělých slinách, směsi vody, solí a enzymů, které se podobají skutečné lidské slině. Zjistili, že resorufin mohou detekovat v reálném čase s velkou přesností a specifičností. Byly schopny detekovat změny v koncentraci glukózy 0.1 mikromolů na litr - 10 násobek citlivosti, kterou lze dosáhnout samotnými interferometry.
Dalším krokem v této práci je, že Pacifici začíná testovat metodu ve skutečné lidské slině. Vědci doufají, že mohou vyvinout malé, samostatné zařízení, které by diabetikům umožnilo neinvazivní sledování hladiny glukózy.
Existují i další potenciální aplikace.
"Nyní kalibrujeme toto zařízení na inzulín," řekl Pacifici, "ale v zásadě bychom mohli tento senzor" plasmonické kyvety "vhodně modifikovat pro detekci kterékoli molekuly, o kterou by nás zajímalo."
Mohl by být použit k detekci toxinů ve vzduchu nebo ve vodě nebo v laboratoři k monitorování chemických reakcí, které se vyskytují na povrchu senzoru v reálném čase.
Plazmonický interferometr může detekovat molekuly glukózy ve vodě. Detekce glukózy v komplexní tekutině je náročnější. Řízení vzdálenosti mezi drážkami a použití chemie barviv na molekulách glukózy umožňuje výzkumníkům měřit hladiny glukózy navzdory 1 procentům slin, které nejsou vodou.
http://www.brown.edu/
Kredity: Obrázek se svolením Brown University