Kas yra citogenetinis tyrimas? Citogenetinė analizė ir ankstyva ligų diagnostika

By Cristiano Antonino On Gruodis 31, 2022

Citogenetinė analizė (arba chromosomų žemėlapis arba kariotipas) yra ląstelių chromosomų tyrimas

Chromosomose yra genų, sudarytų iš DNR – molekulės, kurioje yra visa informacija, reikalinga individo „konstrukcijai“ ir organizmo funkcionavimui.

Žmogaus ląstelėse yra 46 chromosomos: 23 chromosomos yra iš tėvo su spermatozoidu ir 23 iš motinos su kiaušialąste.

Spermatozoidai ir kiaušialąstės yra lytinės ląstelės ir yra vienintelės, kuriose yra tik 23 chromosomos.

Jei spermatozoidas turi X chromosomą, gims patelė, jei Y chromosomą – patinas.

Todėl normalios moters kariotipas bus 46, XX, o vyrų 46, XY.

Norint ištirti chromosomas, būtina naudoti kultūros metodus, nes tik ląstelių dalijimosi metu jas galima vizualizuoti.

RETOS LIGOS? Norėdami sužinoti DAUGIAU, APSILANKYKITE UNIAMO – ITALIJOS RETŲ LIGŲ FEDERACIJOS STEBĖLĖJE EMRGENCY EXPO

Koks citogenetinio tyrimo tikslas?

Citogenetinis tyrimas naudojamas siekiant patikrinti, ar nėra chromosomų skaičiaus ir (arba) struktūros pakitimų, galinčių sukelti ligas, kurioms būdingas protinis atsilikimas (pvz., Dauno sindromas), nevaisingumas / sterilumas (pvz., Turnerio ir Klinefelterio sindromai), psichomotoriniai ir kalbos, augimo ir vystymosi atsilikimas.

Pakartotinis ankstyvas persileidimas taip pat gali būti vieno iš tėvų chromosomų klaidos pasekmė (3-5% atvejų).

Kada tinkamas citogenetinis tyrimas?

Prenatalinė citogenetika

Jis atliekamas nėštumo metu, kai yra padidėjusi vaisiaus chromosomų anomalijų rizika: motinos amžius 35 metai ir vyresnis (iki vaiko gimimo), vaikas, turintis chromosomų skaičiaus paklaidą, tėvai, kurių struktūriniai pokyčiai nerodo klinikinių požymių. požymiai, tėvai, turintys lytinių chromosomų skaičiaus paklaidų (pvz., 47,XXX; 47,XXY ), vaisiaus anomalijos, nustatytos ultragarsu, biocheminių tyrimų indikacijos (pvz., bi-testas), pakartotiniai persileidimai.

Transabdominalinių gaurelių mėginių ėmimas gali būti atliekamas pirmąjį nėštumo trimestrą (9-12 savaičių) arba amniocentezę antrąjį trimestrą (15-18 savaičių).

Choriono gaurelių mėginiams imti iš placentos (choriono gaurelių) paimamos ląstelės, turinčios tą pačią kilmę (taigi ir tą patį genetinį paveldą), kaip ir vaisiaus, o amniocentezė tiria vaisiaus ląsteles, randamas vaisiaus vandenyse (amniocituose).

Postnatalinė citogenetika

Kariotipo tyrimas atliekamas pacientams, kuriems įtariamas chromosominis sindromas, asmenų, turinčių chromosomų anomalijų, tėvams ir giminaičiams, išsigimusių asmenų tėvams arba asmenims, kuriems įtariamas chromosominis sindromas, kurie mirė nenustačius diagnozės, jei yra protinis atsilikimas ir (arba) įgimti defektai, augimo sulėtėjimas. , randami negyvai gimę kūdikiai, poros su pasikartojančiais persileidimais, vyrų nevaisingumas, patelės su pirmine ar antrine amenorėja (menstruacinio ciklo nebuvimas arba nutrūkimas).

VAIKŲ SVEIKATA: SUŽINOKITE DAUGIAU APIE MEDICHILD, apsilankę BOOTH AVARINĖS EXPO

Aborto medžiagos citogenetika

Maždaug 15–20 % visų pripažintų nėštumų baigiasi persileidimu, o daugiau nei 50 % pasikeičia chromosomų skaičius ir (arba) struktūra, dėl kurios nutrūksta nėštumas.

Todėl citogenetinis aborto audinių tyrimas yra labai svarbus norint suprasti nėštumo nutraukimo priežastį ir padėti porai (nes daugeliu atvejų chromosomų klaida yra visiškai atsitiktinė ir nesukelia padidėjusios rizikos, kad įvykis pasikartos).

Navikų citogenetika

Citogenetinė analizė taip pat gali būti atliekama tiriant navikus – tiek hematologinius (pvz., leukemija), tiek kietus (pvz., plaučių, krūties, kepenų, šlapimo pūslės).

Tam tikri chromosomų pertvarkymai yra „specifiški navikui“, todėl, esant klinikiniams įtarimams ar abejonėms, galima teisingai diagnozuoti.

Pavyzdžiui, paciento, kuriam įtariama leukemija, kaulų čiulpų aspirate radus Filadelfijos chromosomą, galima diagnozuoti lėtinę mieloidinę leukemiją; arba t(X;18) translokacijos buvimas ląstelių kultūroje, paruoštoje iš kietojo naviko biopsijos, leidžia diagnozuoti sinovinę sarkomą.

Naujos technologijos: fluorescencinė in situ hibridizacija (FISH)

Sukūrus sudėtingus metodus, žinomus kaip „molekulinė citogenetika“, pvz., fluorescencinė in situ hibridizacija (FISH), galima atlikti išsamesnius citogenetinius tyrimus, nes tai leidžia nustatyti konkrečią DNR seką fiksuotuose chromosomų preparatuose, tarpfaziniai branduoliai ir audinių pjūviai, gauti iš bet kokios rūšies biologinės medžiagos (kraujo, biopsijos, vaisiaus vandenų, gametų), šviežios, užšaldytos arba įterptos į parafiną.

FISH metodas pagrįstas DNR grįžtamojo denatūravimo (dvigubos spiralės atsidarymo) savybe ir apima DNR fragmento, būdingo dominančiam regionui, pažymėto fluorescenciniais junginiais (zondu), prisijungimą prie papildomos preparato DNR sekos. buvo pritvirtintas ir pritvirtintas ant stiklelio: todėl dominanti chromosomų sritis yra lengvai atpažįstama fluorescenciniu mikroskopu.

FISH yra nepakeičiamas tradicinės citogenetikos papildymas, nes jis pasižymi didesne skiriamąja geba: leidžia apibūdinti chromosomų anomalijas, kurių skaičius ir struktūra negali būti apibrėžta klasikiniais citogenetikos metodais, ir identifikuoti paslaptingus persitvarkymus, kurie net nematomi. po didelės raiškos juostų.

Susijusios Žinutės

Sveikatos išlaidos Italijoje: didėjanti našta namų ūkiui

Balandis 11, 2024

Aviary įspėjimas: tarp viruso evoliucijos ir pavojų žmonėms

Balandis 4, 2024

Geltona diena prieš endometriozę

Kov 28, 2024

Viltis ir naujovės kovojant su kasos vėžiu

Kov 27, 2024

FISH nėra įprastai taikomas kariotipų analizei, o tik tam tikrais atvejais, remiantis konkrečiais diagnostiniais įtarimais arba tiriant tam tikrus citogenetinius sutrikimus.

Vienas iš naujausių pritaikymų yra onkologijos srityje: daugeliu atvejų, ypač kietųjų navikų kultūroms, negalima gauti ląstelių augimo ir dalijimosi, todėl chromosomų negalima išskirti ir analizuoti.

Be to, tyrimo, atlikto naudojant tradicinę citogenetiką, skiriamosios gebos lygis neleidžia nustatyti anomalijų, kurios gali turėti įtakos tik vienam genui.

Nuo 2000 metų buvo sukurti DNR zondai, galintys atpažinti specifines anomalijas, pavyzdžiui, sergant šlapimo pūslės vėžiu. Tam naudojami keturi zondai, atpažįstantys 3, 7, 17 ir devynias chromosomas, pažymėtas skirtingais fluorochromais (Multicolor FISH).

FISH nustato navikui būdingus chromosomų anomalijas, kol nėra ligos požymių cistoskopinio tyrimo metu arba kitų diagnostinių žymenų, pvz., CTM (piktybinių navikų ląstelių), pozityvumo.

2001 m. testą patvirtino JAV maisto ir vaistų administracija (FDA), kad būtų galima stebėti ligos pasikartojimą pacientams, kuriems jau buvo diagnozuotas vėžys ir kuriems buvo atlikta pašalinimo operacija ir (arba) gydymas BCG, o 2004 m. - diagnozuoti pacientams, sergantiems hematurija.

FISH taip pat gali suteikti informacijos apie tinkamiausią tam tikro tipo naviko gydymą konkrečiam pacientui (tikslinė terapija).

Pavyzdžiui, žinoma, kad krūties vėžiu sergančios pacientės, kurių FISH yra teigiamas dėl geno, vadinamo HER-2/neu, amplifikacijos, kurio baltymas yra veikiamas naviko ląstelės membranos, reaguoja į gydymą tam tikru vaistu, trastuzumabu, antikūnu. kuris jungiasi prie receptorių ir jį neutralizuoja (imunologinė terapija).

Testas vadinamas PATHVYSION® ir yra patvirtintas FDA.

FISH taip pat gali būti naudojamas tiriant kito geno, vadinamo EGFR, amplifikaciją sergant plaučių ir storosios žarnos vėžiu.

Čia taip pat gali būti naudojami skirtingi vaistai, priklausomai nuo to, ar paciento navikoje randama geno amplifikacija, ar ne.

Tokiais atvejais terapijoje naudojami ne antikūnai, o mažos molekulės, kurios slopina ląstelių dalijimąsi (biologinė terapija).

Taikant FISH kitiems navikų tipams, pvz., melanomai, atsiveria naujos ribos, kur diferencinė diagnozė su displaziniu nevus yra ypač sudėtinga, jei ji pagrįsta vien morfologiniais kriterijais.

Dėl didelio jautrumo, specifiškumo ir numatymo galios FISH metodas yra ypač veiksmingas tiriant tiek hematologinius, tiek solidinius navikus.

Visų pirma, jis turi ne tik diagnostinę / prognostinę vertę, bet ir yra esminis renkantis gydymą pagal naviko genominį profilį.